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植物葉綠素測定儀的實驗步驟

時間:2022-06-08 16:54:40   訪客:522

葉綠素.jpg

植物葉綠素測定儀是用來測量葉綠素含量的儀器。它可以即時測量植物的相對葉綠素含量(單位SPAD)或“綠色程度”,從而了解植物的真實硝基需求量,幫助您了解土壤硝基缺乏情況?;蛘呷绻┯眠^多的氮肥。您可以通過此儀器,提高氮肥的利用率并保護環(huán)境。下面介紹植物葉綠素測定儀的實驗步驟:

1.取新鮮的植物葉子(或其他綠色組織)或干燥的材料,擦去組織表面的污垢,剪碎(去掉中脈),拌勻。

2.稱取0.2g新切好的樣品,共3份,分別放入研缽中,加入少量石英砂、碳酸鈣粉和2-3ml 95%乙醇,研磨成均質(zhì)漿液,再加入10ml 乙醇,并繼續(xù)研磨,直到組織變白。 靜置 3 到 5 分鐘。

3.取1張濾紙,放入漏斗中,用乙醇潤濕,將提取液沿玻璃棒倒入漏斗中,過濾至25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數(shù)次,然后連同殘渣一起倒入漏斗中。

4.用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直到濾紙和殘渣沒有綠色為止。然后用乙醇定容至 25ml,搖勻。

5. 將葉綠體色素提取物倒入光徑1cm的比色皿中。以 95% 乙醇為空白,在 665 nm 和 649 nm 波長處測量吸光度。

實驗結(jié)果計算:將測定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.95A665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度(Ca、Cb:mg/L),二者之和為總?cè)~綠素的濃度。然后根據(jù)下式可進一步求出植物組織中葉綠素的含量:

葉綠素含量(mg/g)=[葉綠素濃度×提取體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重(或干重)。


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